Detection of the HIV-1 ASP protein in infected cells/Détection de la protéine ASP du VIH-1 dans lesc cellules infectées (Nouveau)
Le Virus dimmunodéficience humaine (VIH), lagent causal du SIDA, a été étudié de façon détaillée au niveau de ces gènes et plusieurs études sont en cours afin de mieux définir leurs fonctions. Cependant, quelques études antérieures ont suggéré lexistence possible dun mode dexpression atypique, dont lorientation de ses transcrits seraient à linverse des transcrits habituels. En plus, cette transcription dite antisens aurait la capacité dencoder une protéine nommée Antisense Protein (ASP). Lexistence même de ces transcrits et de la protéine encodée a longuement été controversée et labsence de détection de la protéine ASP dans des cellules infectées a grandement contribué à ce scepticisme. Malgré le fait que plusieurs aspects de ce mode dexpression demeurent toujours inconnus, des découvertes importantes par plusieurs équipes de recherche incluant la nôtre, ont révélé que de tels gènes situés dans une orientation antisens existent chez le rétrovirus humain HTLV-1 et autres virus apparentés. En fonction de notre récente publication démontrant la détection de la protéine ASP dans des cellules de mammifère, nous sommes confiants que ce mode dexpression a réellement lieu pour le VIH-1 et que la protéine ASP joue un rôle essentiel à la réplication virale. Noter présent objectif est de détecter la protéine ASP dans différent types cellulaires ciblés par le VIH et de mieux circonscrire sa fonction dans les cellules infectées. Par ces études, nous comptons utiliser plusieurs approches que nous avons récemment mises au point pour la détection de ASP dans le contexte du génome viral complet et allons poursuivre nos analyses sur des échantillons provenant de patients infectés. Ces expériences seront réalisées dans différents contextes cellulaires, soit des lignées cellulaires de mammifère et des cellules primaires (cellules dendritiques, macrophages et lymphocytes T CD4+) isolés à partir déchantillons sanguins. La présence dASP dans les individus infectés sera aussi démontrée par la détection danticorps spécifiques contre cette protéine virale. Des expériences seront également effectuées pour étudier en détail la fonction dASP. Ainsi, daprès nos récents résultats indiquant que ASP se multimérise, nous allons tenter de déterminer si un lien existe entre cette capacité de se multimériser et linduction dun processus cellulaire nommé autophagie qui a été démontré comme étant requis pour une réplication optimale du VIH-1 dans les macrophages. Comme dernier objectif, nous analyserons directement limpact dASP sur la réplication virale en lien avec linduction de lautophagie. La démonstration quune protéine telle quASP existe représente un élément essentiel à une meilleure compréhension de la réplication du VIH et de sa pathogenèse. Jusquà présent, nous avons accumulé plusieurs résultats démontrant lexistence de la transcription antisens chez le VIH-1 et notre récente publication sur la protéine ASP suggère fortement un rôle au niveau de la réplication virale. En fonction de ces résultats fort prometteurs, il est ainsi impératif dinvestiguer en détail la fonction du gène ASP. Nous sommes persuadés que ce projet démontrera quASP doit être considéré comme une nouvelle cible pour des traitements anti-rétroviraux.
